本篇目录：
- 1、什么是梯度洗脱?洗脱曲线的含义是什么意思?》
- 2、什么是梯度洗脱,为什么?
- 3、在色谱中什么是梯度洗脱和程序升温?
- 4、何谓梯度洗脱?它和气相色谱中的程序升温有何异同?
- 5、如何选择梯度洗脱曲线
- 6、程序升温和梯度洗脱的异同
什么是梯度洗脱?洗脱曲线的含义是什么意思?》
梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比 等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。
梯度洗脱是流动相组分随时间变化。梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。
如果流速太快，分子小的物质来不及扩散，会随着分子大的物质一起被洗脱下来，达不到分离目的；如果流速太慢，大分子物质的下沉的速度与小分子差不多的话，同样达不到分离的目的。
两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合，即有多种洗脱曲线：线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。线性梯度最常用，尤其适合于在反相柱上进行梯度洗脱。
若呈线性梯度洗脱，色谱图中每个谱带宽度相等，各个谱带间具有相同的分离度。
什么是梯度洗脱,为什么?
1、【梯度洗脱】又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
2、如果流速太快，分子小的物质来不及扩散，会随着分子大的物质一起被洗脱下来，达不到分离目的；如果流速太慢，大分子物质的下沉的速度与小分子差不多的话，同样达不到分离的目的。
3、什么是反相色谱？液相色谱有正相和反相之分。正相色谱和反相色谱还有吸附色谱和极性化学键键合色谱之分。如果采用固定相的极性大于流动相的极性，就称为正相色谱；如果固定相的极性小于流动相的极性，则称为反相色谱。
在色谱中什么是梯度洗脱和程序升温?
1、【答案】：在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，称为梯度洗提。是改进液相色谱分离的重要手段。
2、程序升温是通过改变柱温来改变色谱图的峰形和保留时间，而梯度洗脱是通过改变流动相的组成或浓度来改变样品的保留时间和峰形。在程序升温中，柱温是连续变化的，而在梯度洗脱中，流动相的组成或浓度是连续变化的。
3、梯度淋洗用于液相色谱，其目的是改变流动相组分的比例；程序升温用于气相色谱，目的是调整色谱系统温度。
4、梯度洗脱（gradientelution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。
5、梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。
何谓梯度洗脱?它和气相色谱中的程序升温有何异同?
1、不同点：梯度淋洗用于液相色谱，其目的是改变流动相组分的比例；程序升温用于气相色谱，目的是调整色谱系统温度。
2、不同点：程序升温和梯度洗脱的操作方式不同。程序升温是通过改变柱温来改变色谱图的峰形和保留时间，而梯度洗脱是通过改变流动相的组成或浓度来改变样品的保留时间和峰形。
3、两者的要求不同：剃度洗提（又叫做梯度洗提）的要求：洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不致于太拥挤。梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。
如何选择梯度洗脱曲线
1、梯度洗脱有两种实现方式：低压梯度（外梯度）和高压梯度（内梯度）。两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合，即有多种洗脱曲线：线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。
2、涕灭威的测定梯度洗脱有两种方法。观察低压梯度，外梯度和高压梯度，内梯度。尝试以下洗脱曲线，线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。
3、容易出现鬼峰，应作空白试验。梯度选择时尽量几相之间相变化要小，否则不易平衡。
4、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
程序升温和梯度洗脱的异同
程序升温和梯度洗脱的异同如下：梯度淋洗：在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度淋洗与程序升温的共同点：都是为了有效分离样品，提高分离效果。
梯度洗提与气相色谱中的程序升温类似，但是前者连续改变的是流动相的极性、pH或离子强度，而后者改变的温度。程序升温也是改进气相色谱分离的重要手段。
两者的作用不同：梯度洗提的作用：提高柱效，改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时，使用梯度洗脱效果特别好。
程序升温具有改进分离、使峰变窄、检测限下降及节约省时间等优点。而相比恒温来说，对后面出峰的高沸点物质加快出峰，减小扩散，而对于前面组分也会有更大的保留，利于分离。
梯度淋洗是改变流动相组成达到快速分离效果，程序升温是对柱子进行升温，使宽沸程的混合物按照沸点从低到高洗出。相同的是达到快速分离目的，可以提高柱效，缩短分离时间。
梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期，广泛采用程序升温的方法。
到此，以上就是小编对于梯度洗脱程序操作步骤的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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