本篇目录：

• 1、动物细胞培养的基本过程
• 2、肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的co2刺激细胞呼吸,这句话为什么...
• 3、动物细胞培养为啥用单个细胞
• 4、细胞培养步骤
• 5、细胞培养过程中通常在什么条件下保存细胞
• 6、为什么细胞培养需要在CO2培养箱中

动物细胞培养的基本过程

把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶），放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 。④温度和pH（35±0.5℃，2~4） 。⑤气体环境（95%的空气+5%CO 2的混合气体） 。其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定 。

一代贴附生长细胞的生长过程 “-代”指的是从细胞接种到下一-次再传代接种的一段时间 潜伏期(缓慢)游离期：细胞接种后在培养液中呈悬浮状态，此时胞体呈圆球形。一般10分钟一4小时。

另一途径是用外植体或愈伤组织细胞经液体悬浮培养诱导胚壮体再长成植株。

肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的co2刺激细胞呼吸,这句话为什么...

1、CO2的用途一般是维持细胞生长的环境pH和维持基本的溶解CO2含量（应该包括刺激呼吸的功能）。所以，这句话的说法是不够全面的错误。

2、加入CO2是为了调节合适的PH值，CO2没有促进细胞呼吸的作用。

3、加二氧化碳是为了调整PH值，因为动物细胞培养要求PH在2-4之间。一般培养基中是用碳酸氢钠调节PH，随温度时间变化，培养基中的碳酸氢钠会分解，溶液PH也会升高。

4、O2 是细胞代谢所必需的。CO2的主要作用是维持培养液的PH。

5、刚加入的新鲜培养基内的氧浓度，应该和液体中氧的溶解度差不多；培养一段时间之后，由于细胞呼吸培养皿里的氧会被消耗使氧浓度减低（细胞一段时间之后培养基变色也许就是因为这个吧）。

6、SMMC-7721细胞系是于1977年建立，材料取自一名50岁男性原发性肝细胞癌HCC患者的手术切除标本进行体外培养而得。

动物细胞培养为啥用单个细胞

1、有理论认为是某些存在于细胞质中的未知成份影响了动物细胞的脱分化和再分化。多利羊的克隆就是一个间接的例子，多利羊实际上是将完整的羊体细胞核移植到去核卵细胞中的。

2、动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

3、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶），放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

4、④气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。(5)动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。

细胞培养步骤

1、细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗，弃上清液。

2、取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。

3、将细胞转移到一15ml Falcon管中；加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；离心3分钟；弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次；接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；孵育。

细胞培养过程中通常在什么条件下保存细胞

1、这个与细胞的生长代谢有关，在低温下，细胞内的各种酶的活性降低，细胞代谢减慢，延缓了细胞衰老凋亡的速度，而且酶蛋白的结构不被破坏，当温度回升时，酶的活性又重新恢复，细胞机能又重新或得。所以，要在低温下保存细胞。

2、(一)细胞冻存 取待冻存的细胞用胰酶消化(见相关实验细胞传代培养部分)，用培养基将细胞冲洗下来。800 r/min离心5 min，弃上清收集细胞。如果是悬浮生长的细胞，则可直接离心收集细胞。

3、细胞冻存是将细胞储存在低温环境中，减少细胞代谢，实现长期储存的一种技术。

4、培养条件控制：确定适当的培养条件，包括温度、湿度、CO2浓度和氧气浓度。将细胞放置在恒温培养箱或细胞培养箱中，并控制好以上条件。细胞培养和维护：定期观察细胞的生长情况，根据需要添加新的培养基。

5、超低温下保存细胞条件和情况特殊，然而植物体并不一定能适应，更何况在超低温条件下保存的细胞可能是未分化的，而植物体的各个组织细胞已经分化，即便有的能存活但也是极少极少的部分可能只有几个细胞能存活。

6、⑸在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。

为什么细胞培养需要在CO2培养箱中

1、细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。

2、因为二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供最精确稳定的控制，以便于其研究工作的进展，还有就是二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范，并且能够定期消除污染，以保护研究成果，防止样品损失。

3、作用1：促进细胞分裂增殖，一定的CO2浓度能促进细胞的呼吸作用。作用2：在有Na2CO3的情况下，氢离子、氢氧根离子都会与其反应控制PH，可以把pH维持在适宜的范围内。

4、动物细胞多数需要微碱性环境，pH为4左右。在细胞培养过程中，随着CO2释放量的增多，培养基会变酸，因此常加入NaHCO3来调节pH。NaHCO3具有释放CO2的倾向，加入CO2可以抑制这个反应的进行。

到此，以上就是小编对于细胞培养时应使用哪种培养基的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。