本篇目录：
- 1、分子荧光分析法的基本原理
- 2、荧光定量分析方法主要有
- 3、荧光光度法原理
- 4、简述荧光光谱产生的过程
- 5、荧光光谱图怎么分析
分子荧光分析法的基本原理
1、荧光光谱法的基本原理是：当物质受到激发能量作用后，处于激发态的分子会通过无辐射跃迁，释放出一部分能量，并返回到基态，同时发出荧光。
2、当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。
3、即从基态变到了第一单线态或第二单线态等。第一单线态或第二单线态等是不稳定的，所以通过辐射跃迁和非辐射跃迁失去能量返回基态，当电子由第一单线态恢复到基态时，能量会以光的形式释放，所以产生荧光。
4、紫外－可见光区荧光的产生，是由第一电子激发态的最低振动能级跃迁至电子基态的各个不同振动能级所致，而与荧光物质分子被激发至哪一个能级无关。因此，荧光光谱的形状与激发光的波长无关。
荧光定量分析方法主要有
常用的定量方法有：标准曲线法、标准加入法、内标法。荧光分析法(发射光谱分析法)利用荧光强度进行分析的方法，称为荧光法。
实时荧光定量PCR 如要对DNA、RNA样品进行精确定量研究，就需要采用实时荧光定量PCR，根据检测实时荧光PCR产物的方式不同，实时荧光定量PCR主要有DNA结合染料法、基于探针的化学法、淬灭染料引物法等类型。
根据式(2)，可以采用标准曲线法，增量法，内标法等进行定量分析。但是这些方法都要使标准样品的组成与试样的组成尽可能相同或相似，否则试样的基体效应或共存元素的影响，会给测定结果造成很大的偏差。
荧光光度法原理
1、荧光光谱法的基本原理是：当物质受到激发能量作用后，处于激发态的分子会通过无辐射跃迁，释放出一部分能量，并返回到基态，同时发出荧光。
2、在溶液中，当荧光物质的浓度较低时，其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系，即IF=KC，利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析，与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
3、水样用高氯酸-硫酸-钼酸钠消化，再用盐酸将硒(Ⅵ)还原为硒(Ⅳ)。在酸性条件下，硒(Ⅳ)与2，3-二氨基萘反应生成有绿色荧光的4，5-苯并苤硒脑，用环己烷萃取，在激发波长376nm，发射波长520nm下，进行荧光光度法测定。
4、原子荧光光谱法是通过测量待测元素的原子蒸汽在辐射能激发下产生的荧光发射强度，来确定待测元素含量的方法。
5、原理 相同点：吸光光度法和荧光分析法都是分子光谱。
简述荧光光谱产生的过程
【答案】：分子受光能激发后，由第一电子激发单重态跃迁回到基态的任一振动能级时所发出的光辐射，称为分子荧光。激发态分子从第一电子激发态三重态跃迁回到基态时所发出的光辐射称为磷光。
荧光光谱法的基本原理是：当物质受到激发能量作用后，处于激发态的分子会通过无辐射跃迁，释放出一部分能量，并返回到基态，同时发出荧光。
）当有两个以上的光子将一个原子激发到激发态而后发射一个光子时，便形成了多光子荧光。
从图中可以看出，原子荧光的产生是原子吸收过程和原子发射过程的综合结果，这是一种光致原子发光现象。各种元素都有其特定的原子荧光光谱，依据原子荧光强度的高低可测得试样中待测元素的含量。
原子荧光 原子荧光光谱的产生 气态自由原子吸收光源的特征辐射后，原子的外层电子跃迁到较高能级，然后又跃迁返回基态或较低能级，同时发射出与原激发波长相同或不同的发射即为原子荧光。原子荧光是光致发光，也是二次发光。
荧光光谱图怎么分析
光谱分析仪器的图如何分析？光谱分析仪，是一种用于测量发光体的辐射光谱，即发光体本身的指标参数的仪器。峰位分析：观察荧光光谱图中的峰位，确定荧光峰的位置和强度。
获取三维荧光光谱的一般方法，是在不同激发波长位置上多次扫描发射光谱，并将其重叠加以等角三维投影图或等高线光谱的图像形式表现出来。
【答案】：原子荧光光谱分析法(AFS)是通过测定待测元素的气态基态原子在辐射能激发下产生的荧光强度进行元素定量的方法。
根据莫塞莱定律，只要测出X荧光射线的波长，就可确定某元素的存在，只要测出X荧光射线的强度，就可确定某元素的含量。
到此，以上就是小编对于荧光分析法的适用范围的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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