单克隆抗体制备过程（单克隆抗体制备过程中的B淋巴细胞是浆细胞吗）-义乌市趣迅电子商务商行

本篇目录：

(8)单克隆抗体的检定。(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立。(10)单克隆抗体的大量制备。

单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。

【答案】：经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体，是单克隆抗体。

过程 1）免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。

（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液单克隆抗体制备流程 (3)5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。单克隆抗体的应用：①医学诊断；②抗原蛋白的提纯；③肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术。

如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

【答案】：基本原理：小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖，但不能分泌抗体，而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体，但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。

1、④将选择细胞进行规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖(活体培养基)；⑤从细胞培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。

2、单克隆抗体的制备有两种方法：一是体外培养杂交瘤细胞；另一种方法是将杂交瘤细胞注射到小鼠体内，从小鼠的腹水中提取单克隆抗体。

3、实际操作时是从免疫小鼠的脾脏中提取出所有的B细胞，包括必修三中所说的B细胞核效应B细胞（多种。原因是异种抗原表面存在多种抗原决定簇），然后诱导这些细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。

4、还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中就能提取出大量的单克隆抗体了。

5、小鼠单克隆抗体的制备通常涉及以下流程步骤：免疫小鼠：选择一种目标抗原，并将其注射到小鼠体内，以刺激其免疫系统产生特异性抗体。通常会在一定时间间隔内多次免疫小鼠。

6、把这个细胞提取出来和骨髓瘤融合，可以得到持续分泌抗羊红细胞的抗体细胞。脾脏是最大的免疫器官，里面的B细胞多啊，好提取。Balb/c小鼠总共约有脾细胞有1亿个，百分之一是B细胞。

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