外植体灭菌过程（外植体灭菌一般先用什么再用什么浸泡）-义乌市趣迅电子商务商行

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1、植物组织培养中，外植体的消毒常用到以下两种主要的消毒药剂：一是体积分数为70%的酒精，二是质量分数为 2%10%的次氯酸钠溶液。外植体的消毒流程如下。1。

2、先用自来水冲洗10~20min，再用酒精迅速漂洗一下。果实用2%次氯酸钠浸10min，后用无菌水冲洗2~3次。种子则先用10%次氯酸钠浸泡20~30min，难以消毒的可用0.1%升汞消毒5~10min。

3、使用高锰酸钾还应注意，由于高锰酸钾分解放出氧气的速度慢，浸泡时间一定要达到5分钟才能杀死细菌。配制水溶液要用凉开水，热水会使其分解失效。配制好的水溶液通常只能保存两小时左右，当溶液变成褐紫色时则失去消毒作用。

1、外植体：对于植物组织，常用的灭菌方法是使用酒精和次氯酸钙溶液（漂白水）。首先用70%的酒精消毒，然后用次氯酸钙溶液浸泡，以杀死细菌和真菌。玻璃器皿：玻璃器皿和其他实验室物品通常使用干热灭菌或高压蒸汽灭菌。

2、①茎尖、茎段及叶片等的消毒消毒前先对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，然后用自来水冲洗。对于一些表面不光滑或长有绒毛的材料，可用洗涤剂清洗，必要时用毛刷充分刷洗，硬质材料可用刀刮。

3、先用流动的自来水冲洗10～20分钟，脏的外植体用洗衣粉洗涤，或用毛刷、毛笔轻轻刷洗，去掉污物，冲洗后用滤纸吸干外植体的表面水分。在70%的酒精里浸泡15～30秒钟，用无菌水冲洗两次。

4、。清水冲洗把外植体放在清水下冲洗，可以加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20分钟。2。

5、酒精是最常用的表面消毒剂，以70%~75%酒精杀菌效果最好，95%或无水酒精会使菌体表面蛋白质快速脱水凝固，形成一层干燥膜，阻止了酒精的继续渗入，杀菌效果大大降低。

6、在对外植体材料进行灭菌时，灭菌剂需要满足以下条件：有效杀灭细菌：灭菌剂需要能够有效杀灭各类细菌，包括耐热菌、芽孢杆菌和真菌等。

打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。风淋2分钟。0.1%过氧乙酸水泡手，擦干。

（1）接种前要准备好一些无菌棉塞，一起放入接种箱（室）内，以便在所用棉塞受潮时更换。（2）接种时切勿使试管口、瓶口或培养皿开缝处离开酒精灯火焰的无菌区（火焰周围8～10厘米），但要注意不要烧伤菌种。

在进行无菌操作时，首先要保持操作区域的洁净，防止微生物的污染。操作台面、器具和手部等都应该经过严格的消毒处理，以避免微生物的污染和传播。原则二：使用无菌器具使用无菌器具是进行无菌操作的关键。

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