分离提纯抗体过程（分离提纯抗体过程图）-义乌市趣迅电子商务商行

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1、获得新冠病毒抗体的方式有很多，其中包括同一些能够免疫新冠病毒的动物体上提取他们的抗体，研究他们的DNA组成情况以及病毒的结构。

2、非人源化抗体人源化的常用方法是互补决定区（CDR）移植，即非人源抗体的CDR区移植到人源抗体框架区上。通常，会选择与非人源抗体框架区同源性最高的人源抗体框架区作为CDR移植的受体。

3、抗体产生于体液免疫过程。首先是体外异物进入体内，穿过机体的前两层防御（非特异性免疫，就是皮肤、黏液，溶菌酶）。然后异物被巨噬细胞的吞噬，并且经巨噬细胞处理在表面暴露出抗原活性物质。

4、每一种抗体的表位置可以和一种特定抗原结合，就像一把钥匙（抗体）只能打开一把锁（抗原）。

5、另外，根据抗原的免疫效果还可以分成完全抗原和半抗原，或免疫原、变应原和耐受原等；根据抗原与宿主的位置关系还可分成内源性抗原和外源性抗原等。

6、抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体)，如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体，和免疫抗体如抗微生物的抗体。

从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。

以下是几个常用的基于渐进式纯化的单克隆抗体提纯方法：亲和层析：利用抗体特异性识别作用分离抗体。通常会使用吸附剂，例如蛋白A、蛋白G或蛋白L等针对抗体常见的重、轻链、Fc区等部位进行亲和层析。

单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。单克隆抗体的应用：①医学诊断；②抗原蛋白的提纯；③肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术。

细胞融合：采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。

小鼠单克隆抗体的制备通常涉及以下流程步骤：免疫小鼠：选择一种目标抗原，并将其注射到小鼠体内，以刺激其免疫系统产生特异性抗体。通常会在一定时间间隔内多次免疫小鼠。

杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤。(1)抗原制备。(2)免疫动物。(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备。(4)细胞融合。(5)杂交瘤细胞的选择培养。(6)杂交瘤细胞的筛选。(7)杂交瘤细胞的克隆化。

（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液单克隆抗体制备流程 (3)5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

过程 1）免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。

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