本篇目录:
- 1、叶盘法转化烟草的原理
- 2、用文字叙述植物细胞分化的过程
- 3、烟草细胞脱分化和分化培养原理及种子灭菌,培养基配置方法?
- 4、求烟草愈伤培养基的具体配方,只长愈伤,不出芽和生根的那种.
- 5、简要叙述转基因抗虫烟草的培育过程
叶盘法转化烟草的原理
我们可以利用此方法实现烟草叶片背面注射的瞬时转化,该方法可以用于基因的时空表达研究。另外,还提供基因枪和聚乙二醇介导的原生质体转化。叶盘转化法是2019年公布的植物学名词。
叶盘法由于不需进行原生质体操作等,方法简单,获得转化植株也更快,是用植物外植体为材料进行转基因的一个良好途径。
叶盘法实际上是对共培养法加以改进后而创立的一种转化方法。用农杆菌感染叶片外植体并短期共培养。在培养过程中,农杆菌的vir基因被诱导,它的活化可以启动T-DNA向植物细胞的转移。
共培养法是把农杆菌与植物原生质体共同培养以实现转化的方法。其程序包括农杆菌对初生细胞壁的原生质体的转化、转化细胞的筛选和诱导转化细胞分化并再生植株。 叶盘法实际上是对共培养法加以改进后而创立的一种转化方法。
所获得的转化植物有两种基本方法:一种是1979年Marton等以植物原生质为受体的共培养法(ocultivation);一种是1985年Horsch等人建立的叶盘法(leaf disc cocultivation)。 共培养法是把农杆菌与植物原生质体共同培养以实现转化的方法。
用文字叙述植物细胞分化的过程
有丝分裂:是普遍的,根尖、茎尖分生组织、形成层细胞的分裂。包括分裂间期、前期、中期、后期、末期。无丝分裂:也称直接分裂,是细胞分裂中较简单的一种,在分裂时不出现染色体,因此称无丝分裂。
细胞分化的过程大致是:细胞分裂所产生的新细胞,起初在形态、结构方面都很相似,并且都具有分裂能力。后来除了一小部分细胞仍然保持着分裂能力以外,大部细胞失去了分裂能。
⑤末期:核膜、核仁重现,染色体变成染色丝,植物细胞中央形成细胞板,一个细胞分裂形成两个子细胞。动物细胞膜从中间内陷,一个细胞分裂形成两个子细胞。
分裂期可分为前、中、后、末。前期DNA成对排列,DNA还成长丝状, 逐渐螺旋化。细胞核消失。中心体出现,并放出纺锤丝,与DNA的着丝点结合。中期,成对DNA排列在赤道板上。纺锤丝向两中心体拉伸。后期,着丝点分裂。
烟草细胞脱分化和分化培养原理及种子灭菌,培养基配置方法?
1、烟草组培苗实验步骤烟草叶片的组织培养实验原理与实验步骤在植物组织培养中,主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生,使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过脱分化形成愈伤组织,并由愈伤组织再分化形成植物体。
2、(五)灭菌 培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。
3、调节pH值:用pH计测量培养基的pH值,如有需要,可添加适量的酸碱溶液调节pH值。 灭菌:将培养基倒入适当的培养瓶中,用高压蒸汽灭菌器对培养基进行灭菌处理。
4、土壤农杆菌转化植物的常用方法是叶盘法。这种转基因方法十分简单,一般是将植物的叶片切成小圆片,用农杆菌感染后共培养 2-4 天,而后转移到加有选择压的分化培养基上分化出芽,在 MS 培养基上生根后,再生出完整的植株。
求烟草愈伤培养基的具体配方,只长愈伤,不出芽和生根的那种.
1、现简单介绍如下:培养及配方:MS+3%蔗糖+0.7%琼脂(MS为基本培养基,具体配方网上可查,不再赘述),食用色素(根据自己喜欢颜色确定)。
2、生长方式:愈伤组织培养基在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞,而生长素能使部分培养物分流,进入壮苗与生根途径。盐浓度:愈伤组织培养基无机盐浓度高,而生根壮苗培养基无机盐浓度低。
3、微量元素母液的配制 MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物(除Fe )组成。微量元素用量较少,特别是 CuSO4·5H2O、 CoCl2·6H2O ,因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。
4、以茎段进行组织培养比较容易,一般取植物的嫩茎切段作为外植体,切成0.5~1cm长的小段进行接种,保证每个茎段有一个芽点和一片叶子,将芽点部位以下垂直插入培养基凝胶中进行生根培养。
5、愈伤组织:一周后在脱分化培养基上长出淡黄色、松散的愈伤组织。幼芽:愈伤组织转入分化培养基两周后分化出卡那霉素抗性芽。生根:芽转入生根培养基后可以生根。作业要求 诱导出烟草愈伤组织并能够再生植株。
简要叙述转基因抗虫烟草的培育过程
幼芽:愈伤组织转入分化培养基两周后分化出卡那霉素抗性芽。生根:芽转入生根培养基后可以生根。作业要求 诱导出烟草愈伤组织并能够再生植株。每小组交出两三株再生并生根的烟草转基因植株。
每两周更换一次培养基,直至长出不定芽,一般情况为2周。转基因烟草就是利用转基因技术应用到烟草植物的种植中。把吞噬毒素的生物基因嫁接到了烟草植物身上。
转基因抗虫棉的培育过程 获取目的基因 目的基因可以从基因文库中得到,也可以用聚合酶链式反应扩增或者化学的方法去人工合成。
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