本篇目录:
- 1、农杆菌为什么能侵染植物?
- 2、农杆菌转化法的过程
- 3、拟南芥侵染时,为什么用花,侵染过程是什么原理
- 4、农杆菌转化法详细过程
- 5、农杆菌转化实验步骤
- 6、...细菌中(农杆菌),用该细菌感染植物细胞,请问这过程是怎样的详细一点...
农杆菌为什么能侵染植物?
1、农杆菌污染的原因是生活在土壤中的微生物能侵染双子叶和裸子植物。根据查询相关资料信息,生活在植物根表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。
2、农杆菌是一种生活在土壤中的微生物能侵染双子叶和裸子植物(包含水稻在内)农杆菌体内有Ti质粒,当植物受伤时,农杆菌会被植物分泌的酚类化合物所吸引而来,把自己Ti质粒上的T-DNA转移并整合到植物的DNA上去,完成侵染过程。
3、酚类物质和糖类物质既可以作为根瘤农杆菌的趋化物,又可以作为农杆菌中Ti质粒上 Vir区(毒性区)基因的诱导物,使Vir区基因活化,导致T-DNA的加工和转移,从而侵染植物细胞。
农杆菌转化法的过程
1、农杆菌转化法详细过程如下:获得目的基因:用限制性内切酶切割目的基因。基因工程示意图。基因表达载体的构建:目的基因与载体(多为质粒)通过DNA连接酶连接。
2、整个转基因体系的建立步骤大致可以归纳为:基因表达载体的构建-载体的农杆菌转化-农杆菌与植株共培养-转化植株的筛选-转化植株的鉴定。在每一步中都涉及到很多的方法与技术。
3、农杆菌培养至适当浓度。受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。组织块浸泡于菌液中适当的时间。浸泡过的组织块放于共培养基上培养。组织块转移到筛选培养基上培养,选出阳性幼苗。
4、农杆菌GV3101转化质粒的热激法步骤如下: 将-80℃保存的GV3101农杆菌感受态细胞在冰上或室温融化。 在无菌条件下,向刚刚化冻的感受态细胞悬液中加入1 μg需要转化的质粒DNA,轻轻混匀,冰水浴中静置10分钟。
5、农杆菌转化法的原理是构建双元表达载体系统,由两种质粒组成,一种是位于大肠杆菌中的穿梭质粒,另一种是位于农杆菌中的辅助性质粒。
拟南芥侵染时,为什么用花,侵染过程是什么原理
1、原理简单来讲是农杆菌会将载体中的T-DNA区中的序列整合到宿主细胞的DNA。
2、农杆菌浸花法侵染拟南芥植株。拟南芥阳性苗抗性通过构建ERG基因的真核表达载体,利用农杆菌浸花法侵染拟南芥植株,筛选出阳性植株。拟南芥的别称为鼠耳芥,属于被子植物中的一年生细弱草本。
3、注意:湿度要大一些。 转化原理 农杆菌对双子叶植物的创伤部位侵染广泛,在某些条件下对单子叶植物也有一定的感染性。
农杆菌转化法详细过程
农杆菌转化法的过程如下:转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上--进入农杆菌--导入植物细胞--目的基因整合到植物染色体的DNA上--目的基因得以稳定维持和表达。获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因。
整个转基因体系的建立步骤大致可以归纳为:基因表达载体的构建-载体的农杆菌转化-农杆菌与植株共培养-转化植株的筛选-转化植株的鉴定。在每一步中都涉及到很多的方法与技术。
⑦ 置液氮中10 s,放入-20℃冰箱中保存备用。
农杆菌培养至适当浓度。受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。组织块浸泡于菌液中适当的时间。浸泡过的组织块放于共培养基上培养。组织块转移到筛选培养基上培养,选出阳性幼苗。
农杆菌GV3101转化质粒的热激法步骤如下: 将-80℃保存的GV3101农杆菌感受态细胞在冰上或室温融化。 在无菌条件下,向刚刚化冻的感受态细胞悬液中加入1 μg需要转化的质粒DNA,轻轻混匀,冰水浴中静置10分钟。
转化前一天将需要做转化的野生型拟南芥苗子浇水浇透。于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul:10ml接种。
农杆菌转化实验步骤
1、.植株转化实验:农杆菌与植物细胞的共培养,在溶液中加入促进植株愈伤生长的激素能一定程度提高转化率。转化细胞的筛选,大多是利用抗生素进行筛选的,抗生素的选择则需根据目的载体确定。同时进行利用抗生素完成脱菌的过程。
2、农杆菌转化法详细过程如下:获得目的基因:用限制性内切酶切割目的基因。基因工程示意图。基因表达载体的构建:目的基因与载体(多为质粒)通过DNA连接酶连接。
3、农杆菌培养至适当浓度。受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。组织块浸泡于菌液中适当的时间。浸泡过的组织块放于共培养基上培养。组织块转移到筛选培养基上培养,选出阳性幼苗。
...细菌中(农杆菌),用该细菌感染植物细胞,请问这过程是怎样的详细一点...
1、因此,农杆菌必须形成一个跨膜通道。现在认为, VirB蛋白可能充当了这个角色,这些蛋白可能一起在膜上形成一种类似于细菌结合转移时所必需的结构,即接合孔或性毛(sex pilus),T-DNA通过这种孔由农杆菌进入植物细胞。
2、农杆菌转化法详细过程如下:获得目的基因:用限制性内切酶切割目的基因。基因工程示意图。基因表达载体的构建:目的基因与载体(多为质粒)通过DNA连接酶连接。
3、放到植物的伤口,在植物伤口,会释放一种酚类物质,使细菌能容易感染植物细胞中,进去后,农杆菌把ti质粒的TDNA转移到细胞的染色体上。
4、④转移DNA进入植物细胞,并整合到植物细胞基因组中。因为单子叶植物不是农杆菌的天然寄主,况且其不能合成起诱导作用的信号分子,所以限制了农杆菌介导法在单子叶植物中的应用。
5、肯定是质粒。农杆菌附着于植物细胞的愈伤组织,本身留在细胞间隙间。其所含Ti质粒上的一段可转移DNA(T-DNA)首先在农杆菌中被加工、剪切、复制,然后转入植物细胞,整合到植物细胞核基因组中。只有病毒才能在细胞中寄生。
6、农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。
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